Inibição da geração de trombina por dermatam sulfato isolado da pele de Oreochromis niloticus

Resumo

Oreochromis niloticus possui glicosaminoglicanos (GAGs) anticoagulantes de pele, porém desconhecidos são seus efeitos sobre geração de trombina (GT). Caracterizou-se parcialmente GAGs de pele e analisou-se como inibidores de GT. Rendimento de 0,1% da extração com papaína, conteve duas frações separadas por cromatografia de DEAE-celulose, e por combinação de eletroforese de agarose/poliacrilamida e coramento sequencial azul de toluidina/”stains-all”, diferiram quanto à densidade da carga e grupos carboxilados, apresentando tamanhos moleculares ca. 40 kDa. Depolimerização das frações com condroitinase ABC mostrou, por análise em agarose, dermatam sulfato (DS) como GAG único. Ambos os testes do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e do tempo de protrombina mostraram anticoagulação, das frações e DS de mamífero, somente pelo TTPA (0,61; 0,47 e 1,72 UI, respectivamente) contra ao da heparina (193 UI). Frações atuaram sobre ambas vias intrínsica/extrínsica dependente de concentração na GT usando plasma humano diluído 60 vezes, com inativação mais que 50% (41,6 e 83,3 ?g), enquanto em quantidades baixas DS e heparina aboliram totalmente. DS da pele de O. niloticus bloqueia GT in vitro no plasma humano.